水處理采樣準備

　　取樣器材：兩支50mL注射器(配合膜過濾法/濾膜法結果精度可以達到1cfu/50mL=0.02cfu/mL)棉簽一包

　　75%酒精一瓶（檢查有效期及開封日期）

　　戴口罩，一次性手套

　　取樣的核心：

　　1、取到的反滲水樣本跟管道里正常流動的反滲水一致，不能受到污染，同樣也不要有額外的消毒（殘留酒精）；2、取樣口處，透析用水從反滲水管道內部到進入采樣器皿的過程保持無菌（酒精消毒）或不影響檢測結果的反滲水管道內壁環境（流動反滲水沖洗30秒）。采樣標準操作：1.采樣口內部利用管路反滲水沖洗30秒；2.采樣口外部酒精消毒兩次待干；3.即可采樣，采樣時采樣的器皿不能接觸采樣口。因為我們取樣口無法開到較大流量沖洗，會弄得到處都是水，所以為了降低干擾，我院采樣：1.采樣口內部利用管路反滲水沖洗30秒；2.采樣口內外均用酒精消毒兩次待干；3.再次利用管路反滲水沖洗采樣口內部30秒；4.采樣時采樣的器皿不能接觸采樣口。另:（2019版SOP征求意見稿）要求沖洗60秒，并75%酒精消毒外表面3次后待干取樣。透析液采樣：取樣的核心：1、取樣得到的透析液，必須與正常工作時進入透析器的透析液完全一樣，不能有污染或者額外的消毒；2、從透析液供給管快速接頭密封圈之下的位置，隨著每次涌出透析液時采樣，保證采到的透析液是管路里新涌出的，未經過密封圈等污染源（因為實際工作時，透析液也不經過密封圈）；3、當需要大量取樣時，難以從透析液供給管快速接頭取夠樣品，可以考慮利用透析器的無菌環境，從透析器透析液出口端采樣。采樣部位：1.透析液即將進入透析器的快速接頭處（標準認可的取樣部位）2.安裝上無菌的一次性透析器，從透析器的透析液出口端取樣（大量取樣時可考慮）注意：機器自帶機械取樣口嚴禁進行微生物相關的取樣，某些透析機管路上可以重復使用的類似給病人輸藥的取樣口也不建議進行微生物相關取樣。采樣方法：1、透析液即將進入透析器的快速接頭處

　　?機器自檢完畢且管路預充完畢，膜內膜外均已排氣完成，病人上機前；

　　?關閉透析液開關，從透析器上取下透析液供給管的快速接頭；

　　?保持快速接頭開口向上，打開透析液開關，讓透析液自然流出；

　　?在透析液涌出的時間，將取樣吸管或注射器插入快速接頭底部取樣；

　　?在透析液涌出的時間，進行取樣。

　　注意：取樣部位必須在快速接頭底部，同時采樣過程不能碰到密封圈。我們50mL注射器還是從透析器即將進入透析液的快速接頭處慢慢抽取的，但如果取幾百毫升或者幾升透析液，因為用時過長，透析機會檢測到透析液通路不正常而發出各種警報，導致無法順利取樣。2、在難以按照第一種方法取樣時，可以考慮第二種取樣方法（專家共識但未列入標準）安裝上無菌的一次性透析器，從透析器的透析液出口端取樣。

　　?主要流程跟第一種相同，區別在于取樣位置；

　　?透析器膜外排氣完成后，病人上機前，關閉透析液開關，取下透析器透析液出口的快速接頭；

　　?將透析器傾斜45度打開透析液開關讓透析液自然流出；

　　?用已滅菌容器收集透析液。注意容器不能碰觸透析器的透析液出口處。

　　培養基要求:透析用水和透析液進行細菌培養，使用膜過濾法進行培養（與內鏡采樣的濾膜法基本相同），培養基宜選用胰化蛋白胨葡萄糖培養基（TGEA）、R2A營養瓊脂培養基（R2A），或其他確認能提供相同結果的培養基，不能使用血瓊脂培養基和巧克力瓊脂培養基。